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    關于基因組RNA純化試劑盒,你應該知道的事

    更新時間:2021-06-25      瀏覽次數:1804
       基因組RNA純化試劑盒用于各種植物、動物和微生物的RNA提取。每個工具箱都有說明書。實驗者只需遵循說明書中的步驟。它非常方便,適用于RNA的快速提取。提取的RNA完整性好,純度高,可用于分子生物學后實驗。
      該試劑盒可用于從同一細胞或組織樣品中同時純化基因組DNA和總RNA。由于不需要將樣品分成兩部分進行不同的純化步驟,該試劑盒可以在很大程度上回收DNA和RNA。純化后的DNA和RNA分別洗脫,可立即用于各種下游實驗。該試劑盒不含苯酚、氯仿等有毒物質,不需要乙醇沉淀。操作簡單快捷。
      基因組RNA純化試劑盒的操作步驟是什么呢?
      1. 樣品處理
      a、植物組織:在-70℃下取新鮮或冷凍組織100毫克℃然后在液氮中研磨,然后將粉末加入1ml裂解液中攪拌均勻。
      b、動物組織:100毫克新鮮或冷凍-70℃加入1ml裂解液,用組織研磨杵或均質器均質。
      c、貼壁細胞:直接將裂解液加入培養板中裂解細胞,每106個細胞加入1ml裂解液。用取樣器吹勻。
      d、細胞懸液:離心收集細胞。向106個動物、植物和酵母細胞或107個細菌細胞中加入1mL裂解液,混勻。
      e、血液處理:取新鮮血液0.2-1ml,紅細胞裂解液3倍體積,混勻,室溫放置10分鐘,10000rpm離心1分鐘。棄去上清液,如果沉淀中含有紅細胞,加入2倍體積的紅細胞裂解液重復裂解步驟。離心后,沉淀并添加1ml裂解液混合。
      2、將處理后的樣品在室溫下放置5分鐘,使核酸-蛋白質復合物*分離。
      3、向勻漿樣品中加入0.2ml三錄甲烷,蓋上試管,劇烈振動15秒,室溫放置3-5分鐘。
      4、2-8℃離心℃12000rpm,持續10分鐘。RNA主要在上層無色水相中,將水相轉移到新管中,不吸收沉淀。
      5、吸附柱預處理:向吸附柱中加入500ul洗柱液,室溫放置2分鐘,離心轉速2-812000rpm℃放置2分鐘,并丟棄廢液。
      6、向第4步收集的上清液中加入200ul無水乙醇,混勻,加入吸附柱中,靜置2分鐘,2-8轉/分離心℃放置2分鐘,并丟棄廢液。
      7、向吸附柱中加入600ul的漂洗液(使用前請檢查是否加入無水乙醇),離心轉速2-812000rpm℃放置2min,并丟棄廢液。
      8、向吸附柱中加入600ul沖洗液,以2-812000rpm離心℃放置2min,并丟棄廢液。
      9、以12000rpm離心2min,丟棄收集管,將吸附柱置于室溫下幾分鐘,從吸附柱中除去殘留的沖洗液。
      10、將吸附柱放入新管中,將50-100ul無核糖核酸酶ddH2O滴入膜中芯,室溫放置5min,12000rpm離心2min
      即得到RNA。
      好了,以上便是關于基因組RNA純化試劑盒的相關內容介紹了。
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